Video: Spektrofotometrdən istifadə edərək DNT konsentrasiyası necə hesablanır?
2024 Müəllif: Miles Stephen | [email protected]. Son dəyişdirildi: 2023-12-15 23:33
DNT konsentrasiyası edir tərəfindən təxmin edilir 260nm-də absorbansın ölçülməsi, A-nın tənzimlənməsi260 bulanıqlığın ölçülməsi ( ilə ölçülür 320nm-də absorbans), çoxalır tərəfindən seyreltmə faktoru və istifadə edərək münasibət ki, A260 1.0 = 50µg/ml təmiz dsDNA.
İnsanlar da soruşurlar ki, DNT-nin konsentrasiyasını və saflığını necə tapırsınız?
Qiymətləndirmək DNT təmizliyi , digər mümkün çirkləndiriciləri aşkar etmək üçün 230nm-dən 320nm-ə qədər absorbsiyanı ölçün. Ən ümumi təmizliyin hesablanması 260nm-də udma nisbətinin 280nm-də oxuna bölünməsidir. Keyfiyyətli DNT A olacaq260/A280 nisbəti 1,7-2,0.
Eynilə, yaxşı bir DNT konsentrasiyası nədir? A yaxşı keyfiyyət DNT nümunə A olmalıdır260/A280 nisbəti 1,7-2,0 və A260/A230 nisbəti 1,5-dən yuxarıdır, lakin müxtəlif texnikaların bu çirkləndiricilərə qarşı həssaslığı fərqli olduğundan, bu dəyərlər yalnız nümunənizin təmizliyinə bələdçi kimi qəbul edilməlidir.
Bununla əlaqədar olaraq, NanoDrop DNT konsentrasiyasını necə hesablayır?
260 nm-də udma dəyərini sabit bir əmsala vurursunuz (bu, 50 üçün DNT ) və əldə edirsiniz DNT konsentrasiyası . Voila. (Yaxşı, bu, texniki cəhətdən 50-yə vurulan 10 mm qalınlığında nümunənin A260 modelidir; NanoDrop A260-ı sanki nümunə standart kyuvetdə olduğu kimi 10 mm qalınlığında ifadə edir).
DNT-mizi ölçmək üçün niyə spektrofotometrdən istifadə etməli olduq?
A spektrofotometrdir nuklein turşularının orta konsentrasiyalarını təyin edə bilir DNT və ya qarışıqda mövcud olan RNT, eləcə də onların saflığı. İstifadə Pivə-Lambert qanunu edir udulan işığın miqdarını uducu molekulun konsentrasiyası ilə əlaqələndirmək mümkündür.
Tövsiyə:
Sıfır amil qanunundan istifadə edərək kvadrat tənliyi necə həll etmək olar?
Buradan belə nəticə çıxara bilərik: Əgər hər hansı iki ədədin hasili sıfırdırsa, o zaman ədədlərdən biri və ya hər ikisi sıfırdır. Yəni ab = 0 olarsa, a = 0 və ya b = 0 (buraya a = b = 0 olma ehtimalı daxildir). Bu null faktor qanunu adlanır; və kvadrat tənlikləri həll etmək üçün tez-tez istifadə edirik
Vernier kalibrindən istifadə edərək silindrin diametrini necə ölçmək olar?
Silindr/Obyektin uzunluğunu tapmaq üçün: Nonika kaliperinin aşağı çənələrindən istifadə edərək silindri uclarından tutun. Nonius şkalasının sıfır işarəsinin solunda yerləşən əsas miqyasda oxumağa diqqət yetirin. İndi əsas miqyasda işarə ilə düzülən şkala şkalasında işarəni axtarın
Dekartın işarələr qaydasından istifadə edərək xəyali kökləri necə tapmaq olar?
Dekartın işarələr qaydası deyir ki, müsbət köklərin sayı f(x) işarəsindəki dəyişikliklərə bərabərdir və ya ondan cüt ədəd azdır (beləliklə, siz 1 və ya 0 əldə edənə qədər 2-ni çıxmağa davam edirsiniz). Buna görə də əvvəlki f(x)-in 2 və ya 0 müsbət kökü ola bilər. Mənfi real köklər
Qüvvələr paraleloqramından istifadə edərək nəticə qüvvəsini necə hesablayırsınız?
Nəticəni tapmaq üçün tərəfləri tətbiq olunan iki qüvvəyə bərabər olan paraleloqram çəkməlisiniz. Bu paraleloqramın diaqonalı onda nəticə qüvvəsinə bərabər olacaqdır. Buna qüvvələr qanununun paraleloqramı deyilir
Empirik qaydadan istifadə edərək təxmini faizi necə tapmaq olar?
X = 9-dan x = 13-ə qədər əyrinin altındakı sahənin tapılması. Empirik qayda və ya 68-95-99.7% Qayda bir standart sapma (68%), iki standart kənarlaşma (95%) daxilində olan məlumatların təxmini faizini verir. , və ortanın üç standart sapması (99,7%)