Nitroselüloz membran Southern blotlamada niyə istifadə olunur?
Nitroselüloz membran Southern blotlamada niyə istifadə olunur?

Video: Nitroselüloz membran Southern blotlamada niyə istifadə olunur?

Video: Nitroselüloz membran Southern blotlamada niyə istifadə olunur?
Video: #biyoloji #genel biyoloji BÖLÜM 12: DNA Profilleme, Adli Tıp ve Diğer Uygulamalar-1 #genel biyoloji 2024, Noyabr
Anonim

Orijinal protokolda nitroselüloz membran olmuşlar istifadə olunur üçün ləkələmə halda Cənub ləkəsi amma son vaxtlar neylon membranlar üçün həyata keçirilmişdir ləkələmə DNT-ni daha çox miqdarda bağlamaq qabiliyyəti səbəbiylə prosesə təsirli şəkildə imkan verir Cənub ləkəsi az miqdarda həyata keçirilməlidir

Müvafiq olaraq, nə üçün nitroselüloz membran blotlamada istifadə olunur?

Nitroselüloz membranları məşhur matrisdir istifadə olunur proteində ləkələmə yüksək zülal bağlayan yaxınlıqlarına, müxtəlif aşkarlama üsulları ilə (xemilüminesans, xromogen və flüoresans) uyğunluğu və zülalları, qlikoproteinləri və ya nuklein turşularını hərəkətsizləşdirmək qabiliyyətinə görə.

Həmçinin, DNT niyə neylon membrana köçürülür? kimi 0,4 M NaOH istifadə edərək transfer gelin turşuda qısa bir ön emalından sonra həlledici, DNT zamanı depurinasiya olunur transfer . Təsiri DNT ultrabənövşəyi işığa, ya geldə, ya da ondan sonra transfer üçün neylon membran , hibridləşmə qabiliyyətini azaldır.

Bundan əlavə, Southern blotting məqsədi nədir?

A Cənub ləkəsi DNT nümunələrində xüsusi DNT ardıcıllığının aşkarlanması üçün molekulyar biologiyada istifadə edilən bir üsuldur. Cənub ləkəsi elektroforezlə ayrılmış DNT fraqmentlərinin süzgəc membranına köçürülməsini və sonradan prob hibridləşməsi ilə fraqmentin aşkarlanmasını birləşdirir.

Southern blotting məhkəmə araşdırmalarında necə kömək edir?

A Cənub ləkəsi , ixtiraçısı Edvinin şərəfinə adlandırıldı cənub , bir DNT nümunəsində müəyyən bir DNT ardıcıllığının mövcudluğunu yoxlamaq üçün istifadə edilən bir üsuldur. Şəxsin DNT-si xüsusi məhdudlaşdırıcı fermentlə həzm edildikdən sonra yaranan fraqmentlər analiz edilir. Cənub ləkəsi təhlil.

Tövsiyə: