Mündəricat:

Absorbsiyadan DNT konsentrasiyasını necə tapmaq olar?
Absorbsiyadan DNT konsentrasiyasını necə tapmaq olar?

Video: Absorbsiyadan DNT konsentrasiyasını necə tapmaq olar?

Video: Absorbsiyadan DNT konsentrasiyasını necə tapmaq olar?
Video: 10 признаков того, что вы пьете недостаточно воды 2024, Mart
Anonim

DNT konsentrasiyası ölçülməklə qiymətləndirilir absorbsiya 260nm-də, A-nı tənzimləyir260 bulanıqlığın ölçülməsi (ölçülür absorbsiya 320nm-də), seyreltmə əmsalı ilə çarparaq və A260 1.0 = 50µg/ml təmiz dsDNA.

Eynilə insanlar soruşurlar ki, DNT konsentrasiyasını necə tapırsınız?

Orijinal nümunədə DNT konsentrasiyasını təyin etmək üçün aşağıdakı hesablamaları aparın:

  1. dsDNA konsentrasiyası = 50 μg/mL × OD260 × qatılma əmsalı.
  2. dsDNA konsentrasiyası = 50 μg/mL × 0.65 × 50.
  3. dsDNA konsentrasiyası = 1,63 mq/mL.

Həmçinin, yaxşı bir DNT konsentrasiyası nədir? A yaxşı keyfiyyət DNT nümunə A olmalıdır260/A280 nisbəti 1,7-2,0 və A260/A230 nisbəti 1,5-dən yuxarıdır, lakin müxtəlif texnikaların bu çirkləndiricilərə qarşı həssaslığı fərqli olduğundan, bu dəyərlər yalnız nümunənizin təmizliyinə bələdçi kimi qəbul edilməlidir.

Bu şəkildə, DNT 280 nm-də udurmu?

Absorbsiya nisbəti 260 nm vs 280 nm-dir qiymətləndirmək üçün adətən istifadə olunur DNT zülal məhlullarının çirklənməsi, çünki zülallar (xüsusən aromatik amin turşuları) udmaq işıq 280 nm.

DNT konsentrasiyası üçün NanoDrop-dan necə istifadə edirsiniz?

Əsasən nanodrop seçmək imkanı verir DNT , RNT, Zülallar. Seçmək lazımdır DNT , sonra 2 ΜL su qoyun (mili Q üstünlük verilir) ondan sonra ölçünün 0 olduğunu təsdiqləmək üçün "Boş" seçin. Sonra 2 ΜL nümunənizi yerləşdirin. Ölçməni alacaqsınız.

Tövsiyə: