DNT klonlama vektoru kimi adətən nə xidmət edir?
DNT klonlama vektoru kimi adətən nə xidmət edir?

Video: DNT klonlama vektoru kimi adətən nə xidmət edir?

Video: DNT klonlama vektoru kimi adətən nə xidmət edir?
Video: Become A Master Of SDXL Training With Kohya SS LoRAs - Combine Power Of Automatic1111 & SDXL LoRAs 2024, Noyabr
Anonim

Çox növləri var vektorların klonlanması , lakin ən çox ümumi istifadə edilənlər genetik olaraq dəyişdirilmiş plazmidlərdir. Klonlama ümumiyyətlə ilk növbədə Escherichia coli istifadə edərək həyata keçirilir və vektorların klonlanması E. coli-də plazmidlər, bakteriofaqlar (məsələn, faq λ), kosmidlər və bakterial süni xromosomlar (BAC) daxildir.

Həmçinin soruşulur ki, DNT klonlamasında vektor nədir?

Molekulyar olaraq klonlaşdırma , a vektor a DNT yad genetik materialı başqa hüceyrəyə süni şəkildə daşımaq üçün vasitə kimi istifadə edilən molekul, burada təkrarlana və/və ya ifadə oluna bilər (məsələn, plazmid, kosmid, Lambda faqları). A vektor xarici ehtiva edir DNT rekombinant adlanır DNT.

Bir vektoru necə klonlayırsınız? Eksperimental Prosedur

  1. PCR-ni işə salın və PCR məhsulunu təmizləyin: Daxil edilmiş DNT-ni gücləndirmək üçün PCR-i işə salın.
  2. DNT-nizi həzm edin:
  3. Gel təmizləyərək insertinizi və vektorunuzu təcrid edin:
  4. İnsertinizi vektorunuza bağlayın:
  5. Transformasiya:
  6. Bitmiş plazmidi təcrid edin:
  7. Plazmidinizi ardıcıllıqla yoxlayın:

Bu baxımdan, pBR322 klonlama vektoru kimi necə işləyir?

pBR322 Plazmid pBR322 məqsədilə istifadə edilən ilk plazmidlərdən biri olmuşdur klonlaşdırma . Tərkibində tetrasiklin və ampisillinə qarşı müqavimət genləri var. DNT-nin xüsusi məhdudlaşdırma yerlərinə daxil edilməsi bacarmaq tetrasiklin (insertasiya inaktivasiyası kimi tanınan təsir) və ya ampisilin müqaviməti üçün geni təsirsiz hala gətirir.

Hansı texnika DNT-nin müəyyən bir hissəsinin çoxlu surətlərini çox sürətlə düzəltməyə imkan verir?

Polimeraza zəncirvari reaksiya

Tövsiyə: